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反相柱

型    号:
所屬分類:油溶性SEC(GPC)色譜柱
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反相柱是我们应用最广泛的色谱柱类型, 反相柱键合相主要包括:C18、C8、C4、Phenyl、aQ、等。

反相柱産品概述:

  反相柱是我们应用最广泛的色谱柱类型, 反相柱键合相主要包括:C18、C8、C4、Phenyl、aQ、等。对于以上反相柱,我们在使用及维护的时候可以按照同样的操作方式:
  1、在條件允許情況下,在使用前對新色譜柱按照說明書方法進行柱效測試。以確保色譜柱的正常。
  2、所有矽膠基質色譜柱使用温度应低于60℃。
  3、樣品
  將樣品溶解在流動相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度洗脫,則需要將樣品溶解在初始流動相或極性相近的溶劑中。樣品溶液不應含有任何顆粒物,使用0.5μm或更小粒徑的濾膜過濾。樣品溶液如果使用強溶劑(例如,流動相爲水,樣品溶劑爲甲醇),爲達到較好峰形,需要降低進樣量(以250x4.6mm規格爲例,小于10μL)。
  4、流動相
  所有流动相,特别是含有缓冲盐的流动相,当日实验当日配制;如果使用了前日配制的流动相,请确保流动相pH值没有变化,并确保流动相没有长菌。 流动相的pH值取决于您的应用和色谱柱填料类型。我们建议在所有的色谱柱尽量在pH2~8范围内使用。请尽量避免在常规流动相中使用很高比例的水(>95%)作为流动相,可能会造成保留时间的不稳定或者色谱柱键合相的损害。如果使用高比例水或者100%水相为流动相,建议使用亲水柱。
  5、色譜柱平衡
  在進行分析之前,請使用至少20倍柱體積的流動相沖洗色譜柱,以使色譜柱達到平衡。
  色譜柱的柱體積可以通過以下公式估算:
  V=0.68πr2
  V爲色譜柱柱體積(mL),r爲色譜柱內徑(cm),L爲色譜柱長度(cm)。
  6、色譜柱保護
  對于“髒”的樣品以及組分未知的樣品,請盡量使用在線濾器或保護柱,如果可能,使用SPE小柱對樣品進行前處理是更好的選擇。上述做法可以有效延長色譜柱使用壽命。
  7、色譜柱清洗
  常規清洗:
  在儲存色譜柱之前,請使用至少20倍柱體積的不帶緩沖鹽的流動相沖洗色譜柱(去除緩沖鹽),再用更強的溶劑沖洗色譜柱(去除強保留成分,反相色譜通常使用甲醇或乙腈),然後使用合適的溶劑儲存色譜柱。
  清洗強保留汙染物:
  使用如下試劑依次清洗色譜柱
  20倍柱體積不帶緩沖鹽的流動相;
  20倍柱體積甲醇或乙腈;
  20倍柱體積異丙醇;
  20倍柱體積正己烷或;
  20倍柱體積異丙醇;
  20倍柱體積甲醇或乙腈。
  8、 色谱柱保存
  反相柱,保存溶剂通常是含至少30% 有机相的水溶液,也可在常规清洗后直接保存在有机相中。
  如果需要長時間儲藏,則需要使用較高比例的有機相(有機相比例至少大于50%)

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